重组人白介素-2原液纯度检测方法文献综述

 2023-03-02 10:03

重组人白介素-2(125Ser)原液纯度检测方法马宗艳摘 要:用非还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法和根据待测组分分子大小进行分离的分子排阻色谱法来检测重组人白介素-2 (125Ser)原液纯度。

关键词:电泳法;分子排阻色谱法;重组人白介素-2(125Ser);纯度检查 重组人白介素-2(125 Ser)工程菌株系由带有人白介素-2(125 Ser)基因的重组质粒转化的大肠杆菌菌株,其中人白介素-2基因序列中原125位编码半膀氨酸的序列被突变为编码丝氨酸的序列[1]。

白介素-2 ( Interleukin-2,IL-2)是在研究T细胞长时间生长的条件过程中被发现的。

Morgan[2]等于1976 年命名的T 细胞生长因子( T cell growth factor,TCGF)是用植物血凝素( PHA) 、刀豆蛋白A( ConA) 等丝裂原刺激T 淋巴细胞产生的一种细胞因子,在1979年国际淋巴因子会议上被正式命名为IL-2。

IL-2 是目前研究最深入的细胞因子,是机体复杂的免疫调节和反应系统中最重要的淋巴因子之一,具有广泛生物活性,主要由活化的CD4 T细胞和CD8 T细胞产生;它是调控免疫应答的重要因子,既是所有T 细胞亚群的生长因子,又可促进活化B 细胞增殖,具有显著活性,可以刺激全身或局部的免疫应答[3]。

重组人IL-2 是一种非糖基化蛋白,生物活性与天然IL-2 相同。

1992 年在美国经FDA 批准上市,商品名为Proeukin。

此后相继在日本、丹麦等国家上市,批准的临床应用适应证为肾癌、血管肉瘤和黑色素瘤。

1.电泳法1.1实验原理SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法是一种变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离蛋白质的原理是大多数蛋白质都能与阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)按重量比结合成复合物,使蛋白质分子所带的负电荷远远超过天然蛋白质分子的净电荷,消除了不同蛋白质分子的电荷效应,使蛋白质按分子大小分离[4]。

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