开题报告
1.背景介绍
乙醇是一种在全世界范围内都被滥用的物质，尤其在中国社交文化中，酒的作用更是无可替代的。因此，许多违法犯罪行为都与之相关，特别是在交通事故和暴力事件中，酒往往起着推波助澜的作用。乙醇的检测在检案中变得尤为重要。
最直接的检测乙醇摄入量的方法是使用顶空气相色谱法（HS-GC）检测人的血液乙醇浓度（BAC）。这种方法虽然能够提供乙醇摄入的直接证据，但是也存在一定的局限性。乙醇在体内代谢迅速，8小时之内即可全部代谢完成。在一些交通事故中，一些饮酒后撞人的司机选择驾车逃逸来逃避法律的惩罚，同时，在一些受害人被灌醉后性侵的案件中，受害人通常会选择一段时间之后再去报案。在这些案件中，警方在能够采集到当事人血液样品时，当事人的BAC可能已经低于检测限或已经降为0。所以，在这些情况下使用HS-GC检测BAC得出的结果是不可靠的。而在这类案件中通过检测当事人的乙醇非氧化代谢产物就能够解决这个问题。
乙醇在被摄入后大约有0.1% 会通过非氧化代谢途径生成葡萄糖醛酸乙酯（EtG），硫酸乙酯（EtS），脂肪酸乙酯（FAEEs）和磷脂酰乙酯（PEths）。这些代谢产物在体内保留时间长，能够使得乙醇摄入的检测时间从数小时延长到数天甚至数周。EtG和EtS与乙醇相比有更长的检测时限，同时，它们的选择性和敏感性也更高。FAEEs能够在体内存留大约24小时，它更多因为它的细胞毒性而被关注。PEths是乙醇的特征性代谢产物，它只有在乙醇摄入后才会出现，它的检测时限能够达到一周，在酗酒者体内甚至更长，因此是一个值得信赖的乙醇摄入检测标志物。
这些代谢物的检测在之前通常是在全血样品中进行检测，因为全血是作为BAC的检测样品。但本课题组之前的研究表明，乙醇非氧化代谢产物在血液中存在不稳定的现象。为解决这一问题，考虑到使用干血斑作为检测样品进行检测
上世纪初，Ivar Bang 提出用干血斑（DBS）来检测生物样品中的葡萄糖，然而50年过后，干血斑才在新生儿苯丙酮尿症的筛查中被普及。从那以后，更多的生物标记被用于新生儿干血斑筛查项目中。过去几年，干血斑的应用发展迅速，它不仅仅用于新生儿筛查项目，同时也被应用于毒物动力学分析，药物滥用，环境污染等领域。干血斑具有稳定（不易受细菌等侵袭），用量少，操作简单和贮存方便等优点等优点。在法医实际检案中，采集到的血液样品有时只有几毫升甚至几微升，同时还应当保留一部分样品备用，因此需要用极少的检材进行分析，而干血斑用量少的优点正符合这样的需求。同时，之前提及乙醇非氧化代谢产物在血液中存在不稳定的情况，可能造成误判。因此本课题拟采用干血斑作为检测样品，用液质联用法进行检测，并检验乙醇非氧化代谢产物在其中的稳定性，为检案中准确判别当事人饮酒与否提供可靠的检测工具。
2.研究方法
本研究建立了一种液相色谱-串联质谱联用（LC-MS/MS）测定方法，同时测定4类（共10种）乙醇非氧化代谢物（EtG、EtS、6种FAEE及2种PEth）在干血斑中的浓度水平。该研究中，FAEE与PEth为两类物质，其中根据碳链长短不同包含多种化合物。FAEE与PEth种类的选择基于文献报道，选择生物样本中含量最高的几种。FAEE在前期条件摸索中选用报道中含量较高的3种，实际研究中选用含量最高的6种。PEth经文献报道，含量第一与第二的种类分别为PEth 16：0/18：1 和PEth 16：0/18：2，其余种类含量较少。由于PEth 16：0/18：2难以购得，则添加含量较低的一种PEth，PEth 18：1/18：1作为研究目标。
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