1. 拟研究解或解决的问题UFL1是类泛素化修饰Ufmaylation的E3酶。
Ufmylation修饰由三个连续步骤组成的精细酶促反应进行。
在最初的步骤中，UFM1被激活酶UBA5激活，通过腺苷酸化以ATP依赖的方式与UFM1形成高能硫酯键。
在第二步中，将激活的UFM1转移至缀合酶UFC1，以硫酯键连接。
在第三步中，通过UFL1将UFM1转移至目标蛋白。
因此，本课题旨在进行该蛋白的表达纯化，通过大肠杆菌的原核表达系统，通过pMA-c4x载体融合MBP蛋白，在大肠杆菌外周质中进行可溶性表达。
进而通过amylose柱材进行目的蛋白的分离纯化。
得到有活性的UFL1蛋白为进一步进行体外反应，以及检测底物的Ufmylation做铺垫。
从而为后期探索底物修饰的作用打下良好的基础。
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