开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、拟研究问题
肥胖及其相关的共病，对人类健康构成了巨大的威胁。肥胖是由白色脂肪细胞中以脂质形式储存的能量过剩引起的，导致白色脂肪组织（white adipose tissues, WATs）异位和过度沉积。为了改变肥胖治疗的能量平衡，旨在减少能量摄入的策略显示出不佳的效果以及潜在的副作用，所以增加能量消耗的策略引起了研究者们巨大的兴趣。目前针对肥胖的治疗方法包括饮食、体育锻炼、药理学治疗以及外科手术，但这些方法的疗效通常较低，或存在副作用。因此，人们越来越需要新的治疗方法来预防或治疗肥胖。最近的研究显示，脂肪组织水解与血管非炎性蛋白-1（vascular non-inflammatory molecule-1,Vanin-1）有关。在本研究中，我们将设计一种新型靶向纳米载体，通过包载Vanin-1蛋白的mRNA，将其递送到脂肪组织中诱导脂肪细胞中的Vanin-1蛋白过表达，从而促进脂肪水解。而且，聚合物纳米载体与病毒载体相比，具有低免疫原性，高效性以及更强的靶向性。这为肥胖及其相关代谢综合征的临床治疗提供了新的途径。
二、研究手段
1、制备P3-COL-PEG聚合物：精确称取50 mg壳聚糖寡聚乳酸溶于50 ml去离子水中，然后加入10 mg碳二亚胺和5 mg N-羟基琥珀酰亚胺，连续搅拌反应30 min。待反应结束后，分别加入25 mg COOH-NH2-PEG和25 mg P3（CKGGRAKDC） 多肽，在室温下遮光搅拌反应24 h。将反应后的混合物装入透析袋（MW 3500 Da），置于去离子水中透析，每隔4 h换一次去离子水，连续透析3天。将透析后的产物进行真空冷冻干燥，获得的白色絮状物即为P3和聚乙二醇共修饰的壳聚糖寡聚乳酸聚合物（P3-COL-PEG）。
2、P3-COL-PEG聚合物核磁表征：分别将COL、PEG、P3和P3-COL-PEG溶于D2O中进行核磁表征。
3、制备P3-COL-PEG NPs：P3-COL-PEG聚合物与三聚磷酸钠（TPP）发生离子交联反应生成纳米颗粒。具体实验如下：将P3-COL-PEG聚合物与TPP分别溶于去离子水中，经微孔滤膜过滤除去杂质，以一定的体积比将TPP滴加到P3-COL-PEG溶液中，在室温条件下匀速搅拌反应1 h，反应结束后获得的溶液即P3-COL-PEG NPs溶液。
4、P3-COL-PEG NPs表征：将制备好的P3-COL-PEG NPs滴加至铜网碳膜上，在透射电镜下观察纳米颗粒的形状大小。并且利用马尔文粒度分析仪测量纳米颗粒平均粒径与纳米颗粒表面电荷。
5、P3-COL-PEG NPs溶血实验：从小鼠全血中提取血细胞，将不同浓度的纳米溶液与小鼠血细胞混合、孵育。孵育结束后离心取上清，用酶标仪测定其吸光值，根据公式计算不同浓度的纳米颗粒在血液中的稳定性。
6、包载mRNA：测定mRNA的浓度。将一定量的mRNA加入到P3-COL-PEG聚合物溶液中，室温条件下反应0.5 h。然后滴加TPP溶液，在室温条件下搅拌反应1 h。反应结束后，将反应产物高速离心，取上清液，测定上清中mRNA的浓度，根据公式计算出mRNA的包封率和载药率。同时利用琼脂糖凝胶电泳观察比较游离mRNA与mRNA/P3-COL-PEG NPs在血清中的稳定性。
以上是毕业论文文献综述，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
