CHO细胞PEI瞬时转染条件探究文献综述

 2023-02-10 08:02

一、 研究背景全球前十大畅销药物有7种药物是重组蛋白质药物,因此重组蛋白类药物的研究以及开发变得炙手可热。

目前美国食品药品管理局(FDA)批准销售的重组蛋白类药物中大部分由哺乳动物细胞表达系统生产。

重组蛋白的生产方法主要是瞬时转染(transient gene expression,TGE)。

瞬时转染(transient gene transfection,TGE)是指外源的基因转入到宿主细胞后,存在于游离的基因载体上不整合到宿主染色体中,可短时间内获得外源目的基因的表达产物,而随着宿主细胞的不断增值分裂,外源基因最终会消失,这种现象一般持续几天至两周的时间。

为了适应大量蛋白质筛选以及能够快速生产满足临床前研究的需求,所以可以在短时间内得到毫克至克级别的重组蛋白的理化性质,分子构造以及生物学活性等方面能够和原始蛋白类似的基因瞬时转染(transient gene transfection,TGE)技术得到了广泛的应用。

瞬时转染技术常用的细胞是仓鼠卵巢( Chinese hamster ovary cells , CHO)细胞。

目前绝大多数被批准销售的商品化重组蛋白药物都是由CHO细胞株生产的,所以CHO细胞系在重组蛋白在科学研究以及生产中受到了广泛关注。

据 2016 年的发表在 Genetic Engineering 上的数据表明,在前 10 名畅销药物中,生物制品占据了 9 个席位,而其中有 5 种药物使用 CHO 细胞系统生产。

在瞬时转染中常用的基因载体主要有病毒载体(Viral vector)和非病毒载体(Non-viral vector)。

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