开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
随着对癌症早期准确和敏感诊断的不断增长的需求,新诊断技术的发展变得越来越重要[1]。而多孔阳极氧化铝膜因其内部具有高度规则的阵列纳米通道,且孔径可控,已经在化学、生物传感和生物医药领域得到广泛应用。PAA膜具有几何不对称性和电荷不对称性,因此呈现出较高的离子整流效应,已成功用于微量样品中待测分子的检测。细胞表面多糖在多种生物过程中发挥着关键作用,如细胞间通讯,免疫,感染,发育和分化。它们的表达与癌症的生长和转移密切相关[2]。目前,已经开发出许多的方法来实现细胞表面多糖的动态分析,如高效液相色谱(HPLC)[3],质谱(MS)[4],核磁共振(NMR)[5],拉曼光谱[6]和荧光法[7]。近来多项研究发现,细胞表面的糖化合物在细胞病变,病原感染等研究方面具有重要意义[8]。因而,对于生物体内多糖的检测是生物学研究、疾病诊断等的重要手段。本课题基于多孔阳极氧化铝膜(PAA)纳米孔道的特殊的物质传输特性(整流性质),并利用Con A与甘露糖之间的特异性结合,采用电化学的手段,研究新方法检测细胞表面甘露糖的可行性。
1、拟研究问题
通过Con A与甘露糖的特异性结合,实现对于不同浓度细胞表面甘露糖的检测。
2、课题内容
2.1 研究手段
运用电化学方法,通过向PAA膜障碍层一侧的电解池内先加入10%的APTMS的丙酮溶液完成-NH2的修饰,接着加入1mg/ml的Con A溶液进行修饰,接着加0.1%的BSA溶液以将非特异性结合位点阻断,最后向障碍层侧滴加不同浓度的甘露糖溶液得到一系列i-v曲线。
2.2 PAA膜的制备
2.2.1 预处理
剪一块长约6厘米,宽约4厘米的高纯铝片,放置在50ml烧杯中,加入适量的丙酮超声10分钟,超声完的铝片用蒸馏水清洗,之后加入适量的1M氢氧化钾溶液超声10分钟,以对铝片进行化学抛光。
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