一．拟研究的问题 香豆素是白花前胡中主要的生物活性物质，一种常见的中草药。
4-香豆素CoA 连接酶（4CL）CoA催化羟基肉桂酸酯CoA酯的形成，在从苯丙素代谢途径到香豆素主要分支途径的分歧点上起着至关重要的作用。
本文主要是对于4-香豆酸CoA连接酶（4CL）进行克隆并对其功能进行验证。
二．实验目的1.学习掌握PCR，凝胶电泳，酶切，载体构建，转化以及蛋白质纯化技术的原理及操作。
2.熟练地掌握蛋白质功能验证相关的操作如高效液相色谱仪以及质谱仪等。
三．实验方法1.4-香豆素CoA 连接酶（4CL）CoA的克隆，酶切重组，分离纯化。
2.利用高效液相色谱仪、质谱仪等对4-香豆素CoA 连接酶（4CL）CoA进行功能鉴定。
四．文献综述紫花前胡中参与香豆素生物合成的4-香豆酸CoA连接酶（4CL）的克隆与功能鉴定【摘要】香豆素是紫花前胡中主要的生物活性物质，一种常见的中草药。
4-香豆素CoA 连接酶（4CL）CoA催化羟基肉桂酸酯CoA酯的形成，在从苯丙素代谢途径到香豆素主要分支途径的分歧点上起着至关重要的作用。
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