一、立题背景及研究现状
血管内皮是介乎血管平滑肌与循环血液之间的组织，同时也是一种内分泌器官，对维持血管内环境的平衡有重要作用。血管内皮细胞(endothelialcell,EC)是覆盖整个血管腔的扁平单层细胞，以自分泌、旁分泌和内分泌3种形式行驶多种功能，包括主动控制血管张力、维持机体凝血纤溶系统平衡、抑制血小板聚集、减少粘附分子表达、调节单核细胞与EC的粘附以及调节脂质的过氧化等[1]，可产生内皮依赖性因子，起调节血管张力、血管生长、血小板功能和凝血功能等作用。
血管内皮损伤（endothelialdysfunction）是以血管舒张功能减弱、炎症状态及易促发血栓为特征，是冠脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）、高血压、心肌梗死、肾功能障碍等心血管疾病的关键致病因素。现代社会中，环境、压力等导致的亚健康状态以及不健康的生活方式（吸烟、酗酒、高脂饮食等），增加了人类心脑血管疾病的发病率，成为人类健康的第一大杀手。大批的研究数据证实，血管内皮功能损伤是高血压等心脑血管疾病的始动因素[2,3]。内皮细胞结构和功能的完整对维持血管正常的生理活动具有重要的意义，其一旦受损，将导致内皮细胞分泌的血管活性物质如一氧化氮、内皮素等失调，从而导致高血压[4]；同时内皮细胞功能障碍时，中性粒细胞、单核细胞等炎性细胞会向内皮细胞黏附、聚集，继而摄取脂质转化为泡沫细胞，从而促进动脉粥样硬化的发生发展，继而导致冠心病的发生[4,5]。因此，若能开发改善血管内皮功能损伤的药物，在早期即对内皮功能损伤进行干预，可大大降低冠心病的发病率。
山绿茶来源于冬青科植物海南冬青（IlexhainanensisMerr.）的干燥叶，具有悠久的民间药用历史，多泡茶饮，具有清热解毒、消肿止痛、活血通脉的功效[6],主要用于降血压、降血脂、降胆固醇，目前已开发成为多种制剂(如山绿茶降压片、复方山绿茶胶囊、双山冲剂等)。山绿茶作为降压、降脂的常用中成药，具有疗效确切、毒副作用小等优点。冬青素A（ilexgeninA）是山绿茶中主要的三萜类活性成分，本实验室对于其三萜类成分研究比较深入，认为冬青素A在此领域内开发利用具有良好的开阔前景。所以，本项目选择进行山绿茶三萜类成分冬青A对抗血管内皮损伤所致的内皮功能紊乱的效应及关键靶点探索实验。
二.研究内容，研究目标
2.1研究内容
用棕榈酸（PA）作为一种刺激剂，建立大鼠胸主动脉内皮细胞损伤模型，以造成血管内皮功能紊乱；
（1）WesternBlot法测定大鼠胸主动脉NLRP3炎症体、一氧化氮合酶（eNOS）蛋白表达，验证冬青素A对炎症的抑制作用。
（2）免疫组织化学技术检测内质网应激跨膜蛋白IRE-1alpha;、PERK的表达量，验证冬青素A对于内质网应激的抑制作用。
（3）测定大鼠胸主动脉环内皮依赖性舒张，验证冬青素A对血管损伤的改善作用。
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