高产alpha;-淀粉酶细菌的分离筛选、初步鉴定和培养条件优化
一、研究缘由
淀粉酶是一类能够分解淀粉、糖原的酶，其中根据酶水解产物异构类型的不同分为alpha;-淀粉酶、beta;-淀粉酶、gamma;-淀粉酶等。alpha;-淀粉酶是一种十分重要的工业酶，广泛应用于食品工业、粮食加工、酿酒、发酵、制药等行业。近年来，我国淀粉酶产业虽有长足发展，但与国外同行业相比，还有种类和产量相对偏少的问题，为扩大alpha;-淀粉酶生产菌株的种类和alpha;-淀粉酶制剂的品种，适应各行业对淀粉酶的巨大需求，本实验拟从面粉厂附近的土壤取样，分离性能优良的alpha;-淀粉酶生产菌。
二、国内外研究现状
我国的alpha;-淀粉酶制剂的品种不多，这是因为生产菌株种类较少，所生产的alpha;-淀粉酶的酶活也不如国外同行业的产品。在国内最近几年的alpha;-淀粉酶菌种选育中，尽管已经广泛使用基因克隆、转化、转导等分子生物学技术，但目前能够进行商业化生产的alpha;-淀粉酶菌株绝大部分都是从自然界中分离筛选的野生型菌株再经改良和优化得到的。以来源分类，细菌、真菌、放线菌等都能生产淀粉酶，其中高产淀粉酶细菌的菌株种类更丰富，但真菌、放线菌生产的淀粉酶酶活力较细菌更高。
1、高产淀粉酶细菌
张皎皎等从草鱼养殖池塘中取水样和底泥样品，分离筛选得到一株高产淀粉酶菌S458-1，并通过形态学观察、生理生化试验、分子生物学试验方法，确定菌株为蜡状芽孢杆菌，又对其培养条件进行了优化探究，酶活力最高可达17.014U/mL，其产酶条件适用于养殖生产，对鱼体有益[1]。闫丽等从东北寒地土壤中取样，分离筛选到一株温敏型淀粉酶菌株，分子生物学方法鉴定为枯草芽孢杆菌，并测定出最佳培养条件，酶活最高可达0.839IU/mL，该菌株可用以书画类文物修复[2]。陈约慧等从土壤中分离到一株酶活较高、产酶稳定的淀粉酶菌株，酶活最高可达351.78U/mL，菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌[3]。刘延波等从赊店老酒大曲中分离筛选产淀粉酶的细菌，经鉴定为贝莱斯芽孢杆菌，优化后酶活可达164.37U/mL[4]。楼超等从土壤中分离得到高产淀粉酶的菌株，经鉴定为地衣芽孢杆菌，酶活可达1906.2U/L[5]。胡荣等从土壤中分离到产淀粉酶的贝莱斯芽孢杆菌，酶活为234U/mL，并通过紫外诱变，获得该菌株的正突变体，与原菌株相比，酶活提高了1.6倍[6]。权淑静等从麦田土壤中分离到一株高产淀粉酶细菌，并对其培养条件进行了优化，优化后酶活最高可达183.12U/mL[7]。
2、高产淀粉酶放线菌
袁春营等从虾养殖池塘底泥中分离筛选出一株高产淀粉酶菌株，分子生物学方法鉴定为放线菌卢森坦尼洛卡氏菌，并用响应面法优化培养条件，菌株淀粉酶活力可达1000U/mL以上[8]。刘雪珠等从浙江丹山附近海域取样，初步分离筛选出产淀粉酶的放线菌菌株43株，其中产酶能力高的有3株，通过热、超声波及紫外线等多种物理诱变选育出一株高产淀粉酶菌株，培养优化后，酶活可达353.67U/mL[9]。
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