柠檬苦素类似物体外抗炎作用活性筛选文献综述

 2023-01-29 08:01

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

研究目的

对柠檬苦素类似物的抗炎活性进行体外筛选。

研究背景

柠檬苦素类似物(Limonoids)是一类四环三萜类植物次生代谢物质,主要存在于芸香科(Rutaceae)和楝科(Meliaceae)植物的组织中。迄今为止,已从植物体中分离得到大约300多种柠檬苦素类似物,而从柑桔属植物中分离出50多种柠檬苦素类似物,包括 38种柠檬苦素类似物苷元及20种柠檬苦素类似物糖苷(即配糖体,LG)。1841年,首次发现柠檬苦素是柑桔中的主要苦味成分,随后发现了其他柠檬苦素苷元,1989年,Shin Hasegawa博士首次发现柠檬苦素类似物糖苷。目前,能从柑桔中分离出的含量较为丰富的有柠檬苦素、诺米林、诺米林酸(Nomilinate)、奥巴叩酮(Obacunone)、香椽苦素(Ichangin)和脱乙酰诺米林(deacetrylnomilin)。自1989年发现柠檬苦素类似物具有抗癌功能以来,人们对柠檬苦素类似物的生物活性进行了大量研究,发现柠檬苦素类似物具有抗肿瘤、除虫、抗炎、镇痛等很多药理活性。从疏毛吴茱萸(Evodia rutaecarpa var.bodinieri)中分离的柠檬苦素具有明显的镇痛和抗炎作用,对动物经口给予30或100mg/kg浓度的柠檬苦素,可明显减少小鼠舔足时间(甲醛试验);抑制乙酸诱导的血管通透性的增加;抑制角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀反应。另外,对缓激肽诱导的足肿胀和花生四烯酸诱导的耳肿胀也有抑制作用。

环氧化酶(Cyclooxygenase,COX)和脂氧化酶(Lipoxygenase,LOX)是炎症介质生成过程中十分重要的两类酶。在炎症反应中,细胞膜在磷脂酶A2(Phospholipase,PLA2)的作用下释放出花生四烯酸(Arachidonic,AA),AA经COX的作用生成前列腺素(Prostaglandin,PG)、血栓素(Thromboxan,TXA2)和前列环素(Prostacyclin,PGI2),经LOX作用则产生白三烯类(Leukotriene,LT)化合物。COX-2是环氧化酶的诱导性,可以被细菌类脂多糖(LPS)、白介素-1(IL-1)和佛多酯等多种因子诱导。在炎症部位能被诱导急剧升高,从而引起炎症组织中的PG的含量增加,产生红肿、水肿、痛觉过敏和发热。许多抗炎药物通过抑制环氧化酶或脂氧化酶的活性而减少炎症介质的生物合成,从而产生抗炎的作用。

研究方法

利用环氧化酶抑制剂筛选试剂盒和脂氧化酶抑制性筛选试剂盒对柠檬苦素类似物进行体外抗炎活性筛选。

1 原理

1COX酶活性筛选

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