开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、实验背景
细胞色素P450酶（CYP450）是体内药物代谢的重要酶系，主要存在于肝、肠等器官的细胞内质网中，其中CYP2C9又是这一大家族中代谢药物相对较多的酶，约占CYP450总代谢量的10%。在肾脏、脑、肠道和血管平滑肌中也有分布。[1]当CYP2C9酶活性被抑制，一些治疗窗口较窄的底物，如华法林、苯妥英和甲苯磺丁脲，由于代谢变慢，使得生物利用度提高，就会引起严重的不良反应。[2]因此，测定不同药物代谢过程中的CYP2C9酶的活性具有重要的临床意义。
双氯芬酸是CYP2C9的底物，在体内代谢成4rsquo;-羟基双氯芬酸，其代谢程度常用以衡量CYP2C9的活力，在很多研究中作为CYP2C9探针药。[3-5]双氯芬酸还有很少一部分通过CYP3A4代谢为5-羟基双氯芬酸，[6]因此仅检测双氯芬酸在血浆中的浓度将会给实验结果带来一定影响。本实验以双氯芬酸为工具药，运用高效液相色谱法同时测定双氯芬酸及其代谢物4rsquo;-羟基双氯芬酸在血浆中的浓度，结果更为准确可靠。
二、实验目的
建立高效液相色谱法同时测定大鼠血浆中双氯芬酸及其代谢物4rsquo;-羟基双氯芬酸浓度的方法
三、样品处理及色谱条件
根据文献方法[5]及预实验结果已基本定下该分析方法的样品处理步骤和色谱条件
1.样品处理
于50mu;l血浆中加入25mu;l乙腈、25mu;l内标溶液（联苯双酯 1mg/ml），涡旋震荡5min，14000r/min离心10min，取上清液进样。
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