课题名称:治疗性蛋白质药物蛋白质含量测定不同方法的比较
一.研究背景
蛋白质含量的测定是生物化学研究中最常用,最基本的方法之一。蛋白质是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命,机体每个系统都有蛋白质的参与。随着基因工程和蛋白质工程的发展,蛋白质药物以成为医药产品中的重要组成部分。蛋白质药物具有高活性、低毒性、特异性强、生活功能明确,有利于临床运用等特点。因此蛋白质药物蛋白质含量的测定至关重要。
二.本选题研究的目的与意义
本实验的目的是研究不同的测定方法对同一种蛋白质(重组人干扰素alpha;-2b)含量测定的比较,分析所使用的各种方法的优缺点及干扰因素。
蛋白质含量测定法,是生物化学研究中最常用,最基本的方法之一。目前常用的方法有:凯氏定氮法、双缩脲法(Biuret法)、考马斯亮蓝法(Bradford法)、紫外光谱扫描法、Folin-酚试剂法(Lowry法)。本实验采用高效液相色谱法(HPLC法)、Lowry法(中国药典)、Lowry法(欧洲药典)和紫外光谱扫描法4种方法,将Lowry法(中国药典)、Lowry法(欧洲药典)两种方法对重组人干扰素alpha;-2b的测定值与HPLC法的测定值相比较。
值得注意的是,这4种方法并不能在任何条件下适用于任何形式的蛋白质,因为同样一种蛋白质溶液用这4种方法测定,有可能得出4种不同的结果。每种方法都有其优缺点及相应的干扰因素,这正是本实验研究的目的所在。
理论意义:
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